王 潇 严茂祥 何蓓晖 陈芝芸

    浙江中医药大学附属第一医院 浙江杭州 310006

    非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是代谢综合征在肝脏的一种临床表现，是单纯性脂肪性肝炎发展至肝纤维化、肝硬化和肝癌的重要阶段[1-3]。NASH 的发病机制虽未完全明确，但“二次打击”学说现阶段仍处于主导地位。NASH 现有的防治手段除了严格强化生活方式外，尚无其他明确有效的治疗方法。近年来的研究发现，线粒体功能紊乱在NASH 的病理过程中起着重要作用，及时清除细胞内损伤的线粒体对于保护肝细胞具有重要作用。健脾化痰方由二陈汤和四苓散组成，我们的前期研究发现，健脾化痰方能够纠正NASH 大鼠脂质代谢紊乱，减轻肝组织炎症损伤，防止NASH 的进一步发展。本研究从调控自噬来探讨健脾化痰方改善蛋氨酸-胆碱缺乏饮食(MCD)诱导的NASH小鼠的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：SPF 级雄性C57BL/6J 小鼠40 只，体质量约20g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号：SYXK(浙)2018-0012；饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心。

    1.2 健脾化痰方组成：陈皮、半夏、泽泻各15g，茯苓、白术、猪苓各9g，炙甘草5g，生姜3g，乌梅1.5g，均为颗粒剂。

    1.3 主要试剂和仪器：BCA 蛋白质定量试剂盒(biosharp)、总蛋白提取试剂盒(北京普利莱基因技术有限公司)；沉默信息调节蛋白(SIRT1)、p62、Beclin-1抗体(Immunoway 公司)；LC3 抗体(proteintech 公司)；数字病理切片扫描系统(ZEISS 公司)；生物样品匀质器(precellys)；酶标仪(美国BioTek 公司)；凝胶成像仪(Bio-Rad 公司) ......