王 鹤 周青云 戴关海 陈 佳#

    1 杭州市临平区中医院 浙江杭州 311106

    2 浙江中医药大学 浙江杭州 310053

    3 浙江省中医药研究院 浙江杭州 310007

    脑出血(ICH)是最常见的脑卒中亚型，是脑血管病中极为危重的病变之一，具有较高的致死率和致残率，占卒中的10%～15%[1]。血瘀是贯穿ICH 整个过程的特点，活血化瘀是该病的总治法。三七皂苷(Panax Notoginseng Saponin，PNS)是中药三七的提取物，多项研究表明其对脑缺血再灌注、脑血肿吸收、脑组织及神经损伤修复均有明显疗效[2，3]。但三七皂苷分子量大，脂溶性低，不易透过血脑屏障(blood brain barrier，BBB)，影响其药效的发挥[4]。外泌体是一类直径40～160nm 的纳米级囊泡小体，作为信息的载体，可以靶向性传递生物学信息，通过表面粘附蛋白的相互作用转运到周围或者远程的受体细胞从而影响受体细胞的生物功能[5],在炎症、损伤、肿瘤、免疫等疾病治疗方面的作用已被公认，同时，外泌体具有特殊的脂质双层膜结构，可作为治疗药物的载体，高效地透过血脑屏障，更好地发挥中药的疗效[6]。本研究采用自体血注射构建ICH大鼠模型，给予三七皂苷血清外泌体干预，观察其对ICH 大鼠脑组织炎症的影响，为中药治疗ICH 提供新的思路。

    1 实验材料

    1.1 动物：雄性Wistar大鼠40只，体质量(200±20)g，购自浙江维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(浙)2021-0006，实验动物使用合格证号：SCXK(浙)2019-0010。本研究经浙江省中医药研究院伦理委员会审批，伦理审批号：浙中研动物伦理审字第〔2022〕049号。

    1.2 药物：三七皂苷，购于广西梧州制药股份有限公司。

    1.3 主要仪器及耗材：全自动立体定向仪(71000，瑞沃德)、超高速离心机(Optima XPN-100，贝克曼)、透射电子显微镜(JE-OL)、纳米粒径检测仪(ZetaView PMX 110)、Wes 全自动蛋白质印迹定量分析系统(Protein Simple)、Anti-CD63 抗体、Anti-TSG101 抗体和Anti-Hsp70 抗体(abcom) ......