富血小板血浆对人成骨样细胞MG63增殖能力的影响(4)
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参见附件。
2 结果
2.1 ALP染色
ALP染色结果见图1。倒置相差显微镜观察可见3%PRP组细胞染色最深,细胞质可见大量深蓝色颗粒,表明细胞成骨分化活性最强,细胞密度最大,并有细胞增殖。与对照组相比,各组染色随PRP体积分数的增加逐渐加深。另外,各PRP组均有不同程度的细胞脱片,且PRP体积分数越高,脱片越明显,使图像分析系统对细胞数量、染色面积数据的采集造成困难,但对染色深浅无明显影响。实验重复3次,结果与免疫细胞化学实验相印证。
2.2 PI荧光染色
PI荧光染色结果见图2。对照组MG63呈铺路石样伸展,随PRP体积分数的增加,MG63细胞数量增加,密集成群。各PRP组细胞核荧光染色较对照组明亮,有丝分裂期的细胞数较对照组多。没有发现细胞脱离塑料孔板底部。
2.3 免疫细胞化学检测TGF-β表达
各组TGF-β均呈阳性染色(图3),棕色颗粒集中
于细胞质。对照组细胞均匀伸展;PRP组玻片上的细胞出现不同程度的脱片,细胞呈网状聚集,PRP体
积分数越高,聚集越明显,染色越深。对照组、1%、2%、3% PRP组IOD值分别为655.40±20.10、736.20±11.45、790.35±25.20和856.30±21.20。3%PRP组明显高于对照组,其差异有统计学意义(P<0.05)。
2.4 MG63在人工骨材料表面的生长情况
2.8%PRP组细胞在材料表面的数量多于对照组,细胞伸出伪足伸展良好(图4左);对照组材料表面细
胞增殖少 ......
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