牙周炎对动脉粥样硬化影响的动物实验研究(3)
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参见附件。
1.2.5 ELISA法检测血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达水平 将收集的血清按照产品说明进行稀释,通过标准曲线来决定稀释度,最后于波长450 nm处检测其吸光度A值,并用550 nm进行校正,检测血清IL-6、CRP和IL-1β表达水平。
1.2.6 计算髂动脉内膜与中膜的面积比(intimal/medial ratio,I/M) 包埋的切片经髂动脉弹力纤维染色和HE染色后,采集图像,用Image-Pro Plus 6.0图像处理分析软件计算各组髂动脉的内膜面积与中膜面积的比值(I/M)。
1.2.7 巢氏PCR法检测受损髂动脉中的P. gingivalis 实验16周后,切取各组动物的长为4 cm病变段髂动脉,提取病变段组织样本DNA。细菌DNA的扩增采用巢氏PCR法,通用引物和P. gingivalis特异性引物见表1[8]。扩增后采用1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,100 bp Marker估计产物的长度,紫外灯观察,得到清晰条带后停止电泳,凝胶成像分析系统拍照。
1.3 统计分析
采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。组间两两比较采用SNK检验和LSD检验。血清细胞因子、血
管内膜I/M与PD的相关性分析采用多元Pearson相关分析。检验水准为双侧α=0 ......
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