RNA干扰酪氨酸激酶受体2对人脐静脉内皮细胞增殖的影响
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[摘要] 目的 研究抑制酪氨酸激酶受体2(Tie2)对内皮细胞凋亡和增殖活性的影响。方法 采用RNA干扰技术，将含有Tie2基因的特异性短发夹状RNA(shRNA)片段的质粒转染入人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，采用实时定量逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测细胞中Tie2 mRNA和蛋白表达的改变；噻唑蓝比色分析(MTT)法检测细胞的生长情况；显微镜下观察细胞凋亡情况。以转染了pGenesil-hk质粒组为阴性对照，未转染质粒组为空白对照。结果 质粒转染入HUVECs后，实验组细胞中Tie2 mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组下调，尤以转染后48 h Tie2的mRNA和蛋白表达水平下调更为明显(P<0.05)。MTT检测结果显示：实验组细胞的增殖活性受到明显抑制(P<0.05)。转染48 h后，实验组的细胞凋亡率明显高于两个对照组(P<0.05)。结论 RNA干扰技术沉默Tie2基因可致Tie2基因表达下调后诱导HUVECs凋亡，并抑制HUVECs的增殖。
[关键词] 酪氨酸激酶受体2； 细胞凋亡； 人脐静脉内皮细胞； 增殖； 抗血管生成
[中图分类号] Q 253 [文献标志码] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.04.008
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