张、压应力刺激下人牙周膜成纤维细胞早期增殖活性和差异表达基因的变化(3)
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参见附件。
1.6.3 实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain
reaction，PCR) 根据基因芯片分析的结果，选取部分差异表达基因对其进行实时荧光定量PCR，一方面验证基因芯片分析结果的准确性，另一方面对应力信号相关基因的转导机制进行初步探讨。本研究共选择5个基因，分别为人白细胞介素-8(human in-
terleukin-8，hIL-8)、人白细胞介素-6(human inter-
leukin-6，hIL-6)、人环氧合酶2(human cyclooxyge-nase 2，hCOX2)、成纤维细胞生长因子2(human fi-
broblast growth factor 2，hFGF2)、人转化生长因子β受体(human transforming growth factor beta receptor，hTGFBR)以及内参照β-actin。选择的基因及引物序列见表1。提取细胞的总RNA逆转录成cDNA，使用FTC2000型荧光定量PCR仪进行实时荧光定量PCR扩增。
1.7 统计分析
采用SPSS 12.0统计学软件处理数据，用配对t检验进行组间比较，检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 体外培养HPDLF的观察和鉴定
HPDLF在大约7~10 d时，从组织块周围游出，最快者3 d即有单个细胞贴壁(图1左)。培养7~14 d，组
织块周围的细胞贴壁生长，逐渐向四周伸展(图1右) ......
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