血管内皮生长因子和转化生长因子β1基因调控人根尖乳头细胞矿化相关因子的研究(1)
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[摘要] 目的 克隆人血管内皮生长因子(VEGF)异构体中的VEGF165，构建真核表达载体，探讨过表达VEGF165和转化生长因子β1(TGFβ1)对人根尖乳头细胞矿化相关因子的影响。方法 提取人脐静脉内皮细胞系ECV304总RNA，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增VEGF165基因，插入pcDNA3.1hisA，构建重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165，经酶切及测序验证正确后，将其和pcDNA3.1hisA-TGFβ1转染人根尖乳头细胞，采用实时定量聚合酶链反应检测转染效率和骨涎蛋白(BSP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的表达。结果 插入表达载体的VEGF165基因序列与GenBank数据库中的序列具有100%同源性；转染后VEGF165及TGFβ1 mRNA显著增高；各实验组DSPP mRNA的表达均升高(P<0.05)，实验2组和实验3组的OCN mRNA升高(P<0.05)，各组间BSP mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)，DMP1 mRNA均未见表达。结论 成功构建VEGF165真核表达载体，VEGF165和TGFβ1
均能促进人根尖乳头细胞多种矿化因子的表达，与根尖乳头细胞的分化相关 ......
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