大鼠咬合创伤早期牙槽骨细胞间通讯状况研究(2)
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参见附件。
合氯醛(山东大学齐鲁医院制剂室),Trizol(Invitri-gen公司,美国),聚合酶链反应(polymerase chain
reaction,PCR)试剂盒、DNA聚合酶和dNTP(MBI公司,立陶宛),引物(上海生物工程有限公司),27 K
Rat Genome Array芯片的Oligo DNA参自Oligo库(Ope-ron公司,美国),NucleoSpin Extract Ⅱ Kit(Mache-rey-Nagel公司,德国),LuxScan 10 KA双通道激光扫描仪(北京CapitalBio公司),GenePix Pm 4.0图像
分析软件(Axon Instruments公司,美国)。
1.2 动物模型的建立
选用(280±20) g雄性SD大鼠5只为研究对象,腹腔内注射水合氯醛,剂量为100 mg·kg-1。麻醉状态下在大鼠左侧上颌第一磨牙咬合面上粘接厚度为1 mm的方丝,用Super-bond复合树脂堆积法粘接,形成同侧下颌第一磨牙的咬合创伤模型。左侧下颌第一磨牙处牙槽骨作为实验侧,同一只大鼠对侧下颌第一磨牙处牙槽骨为对照侧。常规饮食,24 h后腹腔注射水合氯醛,拔除双侧第一磨牙,刮净牙槽窝内牙周膜,取大鼠双侧牙槽骨组织放入液氮中备用。
1.3 总RNA的提取
按TrizolTMNA Isolation Reagent流程提取所取大鼠牙槽骨中总RNA ......
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