体外成牙环境对牙髓干细胞和外胚间充质干细胞分化的影响(2)
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培养3～4 d后，细胞从小的组织块爬出，部分细胞为椭圆、圆球型，胞浆丰富，胞核呈圆形，居中，有似铺路石样上皮细胞，连成片状簇状生长。周边有大量呈多角形或梭形的成纤维样间充质细胞生长(图1)。行细胞角蛋白多克隆抗体染色后，部分细胞显示红色荧光(图2)。
2.2 BrdU标记的干细胞
在绿色荧光激发下2种干细胞中大部分细胞核呈绿色荧光。免疫组化染色显示大部分细胞胞核阳性着色，标记成功(图3)。
2.3 共培养组细胞的形态学观察
共培养后的细胞形态变化不明显，DPSC共培养组部分细胞有一侧胞浆突起；EMSC共培养组细胞呈
梭形，为成纤维样形态。DPSC和EMSC与TGC间有比较明显的界限，细胞间未见融合现象(图4)。
2.4 共培养组细胞DSP抗原的表达
荧光共聚焦显微镜下观察可见，在绿色荧光激发下，体外DPSC和EMSC共培养组在3、7 d后，都出现部分细胞核呈现绿色荧光；在红色荧光激发下，部分细胞胞浆呈红色着色。二者可表达于同一个细胞(图5、6)。共培养1、3、7 d后，DPSC共培养组DSP阳性细胞的转化率分别为1.01%±0.14%、12.63%±0.16%、23.56%±0.19%；EMSC共培养组DSP阳性细
胞的转化率分别为1.65%±0.01%、19.62%±0.12%、36.52%±0.26%。共培养7 d后，EMSC共培养组转化率较高(P<0.05)。
2.5 免疫组化染色和图像分析结果
共培养后不同时间点两组细胞均有阳性细胞，胞核未着色，胞浆呈棕黄色。共培养1 d时，EMSC共培养组阳性细胞数量与TGC单独培养组差异不大，7 d时部分细胞呈阳性 ......
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