不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定(1)
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[摘要] 目的 分离鉴定变异链球菌临床分离株。方法 收集高龋患者和无龋健康人口腔中牙菌斑标本进行厌氧培养,通过细菌形态学观察、生物化学鉴定、自动微生物分析系统分析、聚合酶链反应(PCR)扩增变异链球菌基因的特异性片段表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ(spaP)、葡糖基转移酶B(gtfB)和葡聚糖酶(dexA)以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定。结果 从32例临床受试者口腔中分离获得46株变异链球菌临床分离株,经生物化学,自动微生物分析系统,变异链球菌的特异性基因spaP、gtfB和dexA的PCR扩增均鉴定为变异链球菌,基因分型发现其中5株临床分离株的基因型与其他菌株相同。结论 获得41株不同基因型变异链球菌临床分离株。
[关键词] 变异链球菌; 基因型; 分离; 鉴定
[中图分类号] R 780.2 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.01.020 变异链球菌(Streptococcus mutans)是人类口腔中最主要的致龋菌[1]。变异链球菌群中各菌种的分离与
鉴定是进行龋病研究的基础。细菌菌种的鉴定方式经历了由传统的表型、血清型方法到以分子生物学为基础的基因型方法的转变。本文采用形态学、生物化学、自动微生物分析系统、扩增变异链球菌基因的特异性片段区域以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定,为龋病临床和基础研究提供材料。
1 材料和方法
1.1 实验菌株
变异链球菌国际参考株Ingbritt(首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所提供),金黄色葡萄球菌临床分离株188号(军事医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室提供) ......
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