高迁移率族蛋白N2抑制口腔鳞状细胞癌增殖作用的体外研究(2)
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1.3.4 Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡 将消化好的Tca8113细胞以每孔5×104个的密度接种于24孔板中，细胞贴壁后弃去原培养基，PBS洗2次。用无血清培养基稀释HMGN2至不同的质量浓度，分别为0、1、2、3 μg·mL-1，将HMGN2与Tca8113细胞共培养，37 ℃作用2～3 h后加入含体积分数为20%血清的培养基，孵育24 h后吸尽每孔的培养基，PBS洗2次后加入4%多聚甲醛200 μL固定3～5 min，PBS洗2次，加入200 μL质量浓度为10 μg·mL-1的Hoechst 33342，避光反应30 min，PBS洗2次后置于倒置荧光显微镜下观察。
1.3.5 Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率 将消化好的Tca8113细胞以每孔5×105个的密度接种于6孔板中，细胞贴壁后弃去原培养基，PBS洗2次。用无血清培养基稀释HMGN2至不同的质量浓度，分别为0、1、2、3 μg·mL-1，将HMGN2与Tca8113细胞共培养，37 ℃作用2～3 h后加入含体积分数为20%血清的培养基，24 h后收集细胞检测细胞凋亡，操作按Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书进行。
1.3.6 HMGN2蛋白对Tca8113细胞周期的影响 将消化好的Tca8113细胞以每孔5×105个的密度接种于6孔板中，细胞贴壁后弃去原培养基，PBS洗2次 ......
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