金属蛋白酶组织抑制剂对涎腺腺样囊性癌表达β—肌营养不良蛋白聚糖的影响(2)
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1.2.6 临床标本中β-DG的表达 选择2010年12月—2012年6月在宁夏医科大学总医院口腔颌面外科住院治疗的7例SACC患者采集标本。患者术前未经任何治疗,所有病例均经病理诊断后确诊,所有患者均行手术治疗。7例患者中,男4例,女3例;年龄42~68岁,平均55岁;病史1~6个月,平均3.5个月;原发部位在左侧者2例,右侧者5例。另外取10例涎腺组织作为对照,其中5例取自舌下腺囊肿的正常舌下腺组织,3例取自腮腺多形性腺瘤瘤旁正常组织(切缘在腮腺下极距病灶约1 cm处),2例取自腮腺腺淋巴瘤瘤旁正常组织。所有标本均于术中切取,大小约1.0 cm×1.0 cm×0.3 cm,立即放入冻存管并投入液氮中保存备用。在制作冰冻切片的过程中,切片机的温度要维持在-20 ℃。切片完成后在冰面上用冷丙酮和甲醇固定4 min,PBS反复冲洗,再将冰冻切片浸入3%过氧化氢溶液中,室温浸泡30 min以灭活内源性酶,PBS液洗片,滴加山羊抗小鼠血清封闭液,室温下作用60 min,甩去多余液体,不洗,后续步骤同1.2.5。
1.2.7 统计学分析 用Image Pro-Plus 6.0病理细胞图像分析系统,将各组免疫细胞化学结果进行图像分析,每张切片至少选取5个高倍(40×10倍)视野,计算出平均光密度值。采用SPSS 19.0统计软件分析数据,不同浓度的GM6001分别干预ACC-M和ACC-2细胞24 h后β-DG表达变化的比较采用单因素方差分析,ACC-M和ACC-2两种细胞株β-DG表达变化的比较采用独立样本t检验 ......
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