丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通路介导的p53基因抑制口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭的实验研究(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
1.2.5 蛋白免疫印迹试验 检测P53、AKT/pAKT、ERK/pERK、P38/pP38、JNK/pJNK、Cyclin D1、P21、Bcl-2蛋白表达，GAPDH作为内参照。具体方法及流程参考文献[3]。
1.2.6 流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况 常规0.25%胰酶消化分离细胞，制备单细胞悬液，每组取3×105个细胞，PBS洗2遍，分别加入RNase酶及PI/Annexin V染料，上机检测细胞周期和凋亡情况。
1.3 统计学分析
采用SPSS 15.0软件对实验结果进行分析，实验数据以mean±SD表示，组间数据比较采用student t检验，α=0.05为显著性检验水准。
2 结果
2.1 Tca8113细胞的转染率
转染rAd-GFP、rAd-p53后，第2天可在倒置荧光显微镜下观察到荧光，以后荧光逐渐加强，5 d达到最强，随后减弱(图1)。500病毒颗粒/细胞的转染复数可使细胞转染率达到近100%。以500病毒颗粒/细胞的转染复数转染细胞，转染5 d后，收集细胞备用。
2.2 rAd-p53转染抑制Tca8113细胞增殖
空白对照组、rAd-GFP组和rAd-p53组Tca8113细胞的增殖情况见表1。通过比较各组Tca8113细胞的增殖情况发现，rAd-p53组细胞的生长相对于空白对照组和rAd-GFP组明显被抑制(P<0.01)(表1)。
2.3 rAd-p53转染对Tca8113细胞侵袭能力的影响
Transwell细胞侵袭实验显示 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。