舌鳞状细胞癌细胞与正常黏膜细胞微泡的差异蛋白组学研究(2)
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参见附件。
1 材料和方法
1.1 细胞株
舌鳞状细胞癌细胞Tca8113购自中国科学院细胞研究所，人永生化口腔黏膜上皮细胞HOK由四川大学口腔疾病研究国家重点实验室惠赠。
1.2 主要仪器和试剂
Leica TCS SP2型激光共聚焦扫描电子显微镜(scanning electron microscope，SEM)(德国莱卡公司)，SJM-300型透射电子显微镜(transmission electron microscope，TEM)(日本电子株式会社)，CP70 MX型冷冻高速离心机(日本日立公司)，BIO-RAD450型酶联免疫检测仪(美国伯乐公司)，稳压电泳系统(美国伯乐公司)，DU530型核酸/蛋白分析仪(美国贝克曼公司)，IPGphor等电聚焦仪、Ettan DALT six大型垂直电泳系统(美国通用电气公司)，Ultraflex Ⅲ质谱仪(美国布鲁克公司)；蔗糖、重水(D2O)、硫脲、除高峰度蛋白质试剂盒、碳酸钠、碳酸氢钠(Sigma公司，美国)，DMEM高糖细胞培养基、角质细胞无血清培养基(defined keratinocyte-serum free medium，DK-SFM)(Gibco公司，美国)，胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)(杭州四季青生物工程材料有限公司)，胰蛋白酶、鼠抗人主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major his-tocompatibility complex class Ⅰ，MHC-Ⅰ)单克隆抗体、鼠抗人热休克蛋白-70(heat shock protein-70，HSP-70)单克隆抗体(Santa公司，美国)，辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG结合物(武汉博士德生物工程有限公司)；Image Scanner扫描仪和LabScan软件，低熔点琼脂糖、固相pH值干胶条、蛋白质纯化试剂盒、定量试剂盒、考马斯亮蓝[安玛西亚生物技术(上海)有限公司] ......
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