粪肠球菌体外根尖生物膜模型的建立及形态学研究(2)
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2 结果
2.1 SEM观察不同时间生物膜的形成过程及覆盖率
2.1.1 不同时间生物膜形成过程的观察 通过SEM观察，1 d组样本表面的大部分区域未发现细菌附着，可见单层次散在分布的细菌，细菌之间无细胞外基质连接(图2A)；2 d组样本表面可见细菌单层散在分布，细菌之间出现细胞外基质连接，大部分区域仍未发现细菌附着(图2B)；7 d组可见表面有大量细菌附着，细菌呈群落分布，形成多层次的空间结构，有大量细胞外基质包绕，并形成亲水通道(图2C)；对照组表面无细菌及细胞外基质附着(图2D)。
2.1.2 不同时间生物膜覆盖率的比较 SEM观察1、2、7 d组的表面生物膜覆盖率分别为3.16%±2.23%、5.80%±3.27%、17.23%±1.52%，平均9.04%±6.87%；对照组表面无细菌及细胞外基质附着。随着培养时间的增加，样本表面的生物膜覆盖率也增加。经统计学分析，数据均满足正态分布特征，且方差齐；经单因素方差分析，7 d组与1 d组之间、7 d组与2 d组之间的差异有统计学意义(P<0.05)，而1 d组与2 d组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。
2.2 CLSM观察不同时间生物膜的形态和结构
2.2.1 不同时间生物膜的形态和荧光面积 随培养时间增加，PI染色的红色荧光面积增加，ConA-FITC染色的绿色荧光面积从无到有，生物膜荧光总面积增加(表1和图3)。1 d组样本表面细菌散在分布，无细胞外基质(图3A)；2 d组样本表面细菌增多，无细胞外基质(图3B)；7 d组表面有大量细菌，部分呈团状分布，周围有大量细胞外基质包绕(图3C)；对照组表面无细菌及细胞外基质(图3D)。
2.2 ......
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