人骨形态发生蛋白2真核表达载体构建及其基因/人骨形态发生蛋白2真核表达载体构建及其基因/(3)
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1.3.4 CS/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体形貌观察 取N/P=5的CS/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体悬液，滴于新剥离的云母片上，分散均匀，过夜使其自然干燥，原子力显微镜观察纳米复合体的形貌。设置空白云母片组及N/P=10组作为对照。
2 结果
2.1 pIRES2-EGFP-hBMP2-His重组质粒的鉴定以及
测序
pIRES2-EGFP-hBMP2-His重组质粒经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切后，可见载体片段(5 308 bp)及目的基因片段(1 209 bp)，酶切结果正确(图1)，表明经转化、扩增、抽提后的质粒为目的质粒。经基因序列测定及分析后未见突变，pIRES2-EGFP-hBMP2-His重组质粒与GenBank的BMP2基因同源序列的比较表明，与人BMP2基因具有高度同源性。
2.2 CS/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体粒径大
小、分布及Zeta电位检测
不同N/P比值下各组CS/pIRES2-EGFP-hBMP2-His纳米复合体的粒径大小见表1。从表1可见，5组壳聚糖在不同N/P比情况下均能与pIRES2-EGFP-hBMP2-His质粒复合形成纳米复合体，粒径111.7～
3 214.2 nm不等，A、B、C组在N/P≥5时及D、E组在每个N/P比情况下均可以形成两种不同粒径大小的纳米复合体。纳米复合体的粒径主要集中在两个区域范围 ......
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