白细胞介素—23通过无翅基因相关整合位点/β—连环蛋白通路增强舌鳞状细胞癌抗凋亡及耐药能力(3)
1.7 Western blot检测Bcl-2、P-gp、β-catenin、ABCG2蛋白的表达将处于对数生长期的SCC9细胞株分为β-catenin-
siRNA预处理组和未处理组。沉默β-catenin的靶向小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)正义序列:5’-GUCCUGUAUGAGUGGGAACTTdTdT-3’;反义序列:5’-GUUCCCACUCAUACAGGACT-TdTdT-3’。24 h后分别换用含10 ng·mL-1 IL-23培养基处理或正常培养基处理。继续培养24 h后提取总蛋白,分光光度计Biomate 3s测定蛋白浓度,煮沸变性,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离蛋白,将蛋白转移至聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride ......
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