人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达
 |
| 第1页 |
参见附件(261KB，3页)。
摘要：目的 构建表达人脑源性神营养因子hBDNF的基因工程菌。方法 人工合成1对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以人血白细胞基因组DNA为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接后，再定向插入原核表达载pBV220，将重组pBV220-hBDNF转化大肠杆菌DH5a，经42℃热透导表达。结果 经限制性酶切和DNA测序证明重组入载体中的DNA片段确为hBDNF，并成功表达出hBDNF蛋白。结论 该研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达，表达效率达25%，为今后生物学活性的研究和神经系统疾病的基因治疗奠定了基础。
关键词：脑源性神经营养因子；PCR；A-T克隆；基因表达
中图分类号：R394.8；Q782 文献标识码：A 文章编号：1000-5749(2004)03-0326-03
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(261KB，3页)。