1.3 实验方法

    1.3.1酒精依赖模型的建立

    参照Turchan J等[11]的方法将模型组大鼠的饮水换成含6%(v/w)酒精的水溶液(自购买配制)，作为唯一的饮水来源共30天，酒精水溶液每天9AM配制置换。对照组大鼠自由饮水，每天9AM更换。间隔6天模型组及对照组大鼠称体重一次，并记录饮酒量和水量。30天后，行戒断评分。

    1.3.2血液酒精浓度的测定

    在大鼠饮6%( v/w)酒精水溶液第16、30天尾静脉取血0.3 ml，-4℃保存。用酶标仪(EL304I) (美国BIOTEK)快速测定大鼠血液酒精浓度。测试方法：在每一个测试样品管中加入 0.4mL 高氯酸( 0.5N)； 在上述样品管中分别加入 0.1mL 的样标(美国Chemicon公司)(0, 0.02, 0.1, 0.2, 0.4%)和待测的血清样品； 震荡10s，放置5min；离心5min(4000rpm)；取 10uL 或 20uL 上层清液，加到相应酶标板的微孔中； 分别加入100uL 缓冲液 (RA) 和酶溶液 (RE) (美国SEO公司常州分公司)；将酶标板放置在黑暗中30 min；设置读数波长在340nm；计算结果。

    1.3.3酒精、水自由选择

    大鼠单笼饲养，将两只分别装有6%(v/w)酒精水溶液和净化水(用美国Millipore公司反渗膜纯水制备仪制备)的饮水瓶固定置于每一饲养笼中 ......