陈善源，邓立东，徐 勤，冯乐平，黄岚珍，于冉冉(桂林医学院，广西桂林 541004)

    罗汉果甜苷(Mogrosides)是一组含三萜苷元(罗汉果醇，Mogrol)和不同数目葡萄糖残基的糖苷，为葫芦科植物罗汉果(Siraitia grosvenorii)提取物的主要甜味成分[1]。罗汉果甜苷对四氧嘧啶复制的糖尿病模型动物有抗氧化和控制血糖水平的作用[2]，而对正常动物的血糖无显著作用[3]。近年研究[4]提出胰岛素抵抗导致的血糖血脂水平调节紊乱可使胰岛B细胞处于持续的氧化应激状态，活化叉头框蛋白-1(FOXO1)等转录因子，抑制葡萄糖代谢和胰岛素合成，损害胰岛素分泌功能并导致凋亡。罗汉果甜苷可能通过抗氧化作用保护胰岛B细胞的胰岛素分泌功能并控制糖尿病动物模型的血糖水平，但具体作用机制的研究尚未见文献报道。本研究通过观察罗汉果甜苷干预棕榈酸导致的胰岛B细胞氧化应激损伤效应，初步探讨罗汉果甜苷通过抗氧化作用保护胰岛B细胞的机制，为今后进一步阐明罗汉果甜苷的降血糖机制奠定坚实的理论基础。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    SW-CJ-2F型超净工作台(苏州净化设备有限公司)；Galaxy 170 S型CO2细胞培养箱(德国Eppendorf公司)；FACSAriaⅢ流式细胞仪(美国BD公司)；Tprofessional PCR仪(德国Biometra公司)；DYY-6D型琼脂糖电泳仪(北京六一仪器厂)；JS-780型凝胶成像仪(上海培清科技有限公司)。

    1.2 试药

    罗汉果甜苷(桂林莱茵生物科技股份有限公司，其中罗汉果甜苷含量为50%)；棕榈酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；低糖Dulbecco's改良Eagle's培养基(DMEM)培养液、高糖DMEM培养液、胎牛血清(美国Thermo Scientific公司)；0.5%含乙二胺四乙酸(EDTA)、胰酶与D-Hank’s溶液(美国Invitrogen公司)；二氯荧光素双酯(DCFH-DA)法活性氧检测试剂盒、异硫氰酸荧光素(FITC)标记Annexin V细胞凋亡检测试剂盒(上海碧云天生物技术研究所)；超纯RNA提取试剂盒、HiFi-MMLV逆转录cDNA合成试剂盒与2x Es Taq Mastermix PCR试剂盒(北京康为世纪生物技术有限公司)。

    1.3 细胞

    小鼠胰岛B细胞系NIT-1细胞由桂林医学院冯乐平教授研究组惠赠。

    2 方法

    2.1 NIT-1细胞培养与传代 ......