2.2 单因素试验优化蝉蜕蛋白的提取工艺

    蝉蜕蛋白的提取量受多种因素的影响，蛋白含有可解离的氨基和羧基，pH会影响解离基团的解离、改变蛋白所带电荷，从而影响蛋白的溶解性[13]。查阅大量文献发现，液料比、提取时间、提取次数是影响蛋白提取率的关键因素[14-17]。故本研究选样品溶液pH、液料比、超声时间、提取次数为因素，考察其对蝉蜕蛋白提取量的影响。

    2.2.1 样品溶液pH对蝉蜕蛋白提取量的影响 精密称取蝉蜕脱脂粉末2 g，置于锥形瓶中，加入15倍量75%乙醇，用氢氧化钠分别调样品溶液pH至7、8、9、10、11，室温超声提取2次，每次60 min。提取液滤过，合并滤液，加水定容至250 mL，按照“2.1.1”项下操作，测定样品吸光度并计算其中蛋白含量，结果见图1A。

    由图1A可知，蝉蜕蛋白提取量随样品溶液pH的增大而增大，当样品溶液pH小于10时，随着溶液pH的增大蝉蜕蛋白提取量变化较快，当样品溶液pH大于10时，变化趋于平缓，考虑到强碱可能会导致蝉蜕蛋白结构破坏，从而引起蛋白变性失活，因此本研究将蝉蜕蛋白提取液的pH固定为10 ......