2.4 黄芪甲苷对细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3、ANP mRNA表达的影响

    按“2.2”项下方法饥饿处理细胞后分组给药，培养24 h后收集细胞，采用Trizol法提取细胞总RNA，反转录为cDNA，然后利用特异性引物进行扩增。反应体系：2×qPCR SYBR Green Master Mix缓冲液 5 μL，2 μmol/L的上、下游引物各1 μL，cDNA模板3 μL，总体积为10 μL。反应条件：94 ℃预变性 4 min；94 ℃变性30 s，55 ℃退火40 s，72 ℃延伸30 s，35个循环；然后以72 ℃延伸5 min结束反应。扩增结束后以GAPDH为内参，采用Quante Studio Soft 1.3软件通过2ΔΔct法进行相对定量分析。引物序列和产物长度见表1。

    2.5 统计学方法

    采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计量资料以x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

    3 结果

    3.1 细胞的培养和鉴定结果

    倒置相差显微镜观察结果显示 ......