海南省汉族人群HLA—B*5801基因多态性与别嘌醇所致不良反应的相关性研究(2)
1 资料来源与方法1.1 临床资料
收集海南省人民医院2015年9月-2017年9月具有别嘌醇使用指征的海南省汉族人群资料及其服药后3个月内的不良反应发生情况。共收集患者149例,主要来源于肾病风湿科129例、医疗保健科20例,根据是否发生不良反应分为使用别嘌醇后未发生不良反应的耐受组和使用别嘌醇后发生不良反应的不良反应组。耐受组共133例患者,平均年龄(51.65±19.9)岁,男性89例,女性44例;不良反应组共16例患者,平均年龄(49.25±17.56)岁,男性10例,女性6例,两组患者年龄和性别分布差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2 基因检测
利用原位杂交荧光染色分析技术检测患者基因型。具体操作:(1)氯化铵溶液与灭菌注射用水按照1 ∶ 9比例稀释作为预处理液,对用乙二胺四乙酸钠抗凝采血真空管采集的临床全血样本进行编号,上下颠倒混匀。(2)取对应编号的1.5 mL离心管加入1.2 mL预处理液与150 μL混匀的临床全血样本上下颠倒10次混匀,然后放于室温环境静置5 min。(3)将样本放入离心机中,700×g离心5 min。(4)去上清液后离心管底部可见约2 mm×2 mm的白细胞沉淀,若团块过小须重复(2)~(4)步骤。(5)向离心管中加入50 μL PHARM-GENE01SNP分析保存液(北京华夏时代基因科技发展有限公司)反复吹打混匀 ......
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