在前期试验中，笔者先以乙腈-水为流动相，考察了二者多个体积比的分析效果，但峰形均拖尾严重。之后发现在流动相中加入0.1%的甲酸可以提高灵敏度和改善峰形[15]。由于文拉法辛为碱性物质，梯度洗脱中可在流动相的水相中加入酸，所以加入0.1%甲酸后，峰形得到改善，减少了拖尾现象，并且增加了检测的灵敏度和精密度，提高了分离能力。因此本研究以乙腈和0.1%甲酸作为流动相。另，本试验采用地西泮作为内标物。采用内标法可更进一步减少检测干扰和系统误差。血浆样品处理是方法学建立的重要步骤，本研究采用乙腈沉淀血浆蛋白的方法处理样品，方法简单、用时较短，且萃取率高。

    综上所述，本研究建立的UPLC-MS/MS法可同时测定美沙酮与文拉法辛及其代谢产物的含量，且该法具有专属性高、分离完全、检测时间快的特点，可用于美沙酮与文拉法辛的血药浓度检测，以及为进一步研究美沙酮与文拉法辛及其代谢产物在大鼠体内的药动学提供依据 ......