采用UPLC—MS/MS法研究辣薄荷基厚朴酚在不同种属肝微粒体中的代谢特征(3)
2.2.2 内标贮备液及内标溶液 取内标对照品10.00 mg,精密称定,用甲醇定容至10 mL棕色量瓶中,混匀,即得质量浓度为1 mg/mL的内标贮备液,于4 ℃冰箱中密封保存,备用。临用前,用甲醇稀释至相应质量浓度,即得内标溶液。2.2.3 特异性抑制剂溶液 分别取细胞色素P450(CYP)酶抑制剂硝酸毛果芸香碱、奎尼丁、盐酸噻氯匹定、酮康唑、磺胺苯吡唑、二乙基二硫代氨基甲酸钠、α-萘黄酮对照品各10.00 mg,精密称定,用甲醇分别定容至10 mL棕色量瓶中,混匀,即得质量浓度均为1 mg/mL的特异性抑制剂贮备液,于4 ℃冰箱中密封保存,备用。临用前,用甲醇稀释至相应质量浓度,即得特异性抑制剂溶液。
2.3 样品孵育与处理
2.3.1 样品孵育 参照文献[8]配制孵育体系。其总体积为200 μL,包含磷酸盐缓冲液(PBS,100 mmol/L,pH 7.4)188 μL和NADPH孵育系统12 μL(含A液10 μL和B液2 μL),于冰浴上混合而得(现用现配) ......
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