Box—Behnken设计—响应面法优选雪松松针中蛇床子素的提取工艺(1)

http://www.100md.com 2019年2月1日 《中国药房》 20193

     中图分类号 R932 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2019)03-0359-05

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.03.16

    摘 要 目的：优选雪松松针中蛇床子素的提取工艺。方法：采用高效液相色谱法测定蛇床子素含量。在单因素考察的基础上，以乙醇体积分数、提取时间、料液比为考察因素，以蛇床子素含量为响应值，采用Box-Behnken设计-响应面法优选雪松松针中蛇床子素的提取工艺，并进行验证试验。结果：确定的最佳提取工艺为乙醇体积分数88%，料液比1 ∶ 20(g/mL)，提取2次、每次57 min。在此工艺条件下，提取得到蛇床子素的平均含量为0.675 7 mg/g(RSD=1.78%，n=3)，与预测值0.680 9 mg/g的相对误差为0.59%。结论：优选的最佳提取工艺方法简便、可行，可用于雪松松针中蛇床子素的提取。

    关键词 雪松松针；蛇床子素；提取工艺；Box-Behnken设计；响应面法

    ABSTRACT OBJECTIVE： To optimize the extraction technology of osthole from the pine needles of Cedrus deodara. METHODS： HPLC method was adopted to determine the content of osthole. Based on single factor test， ethanol volume fraction， extraction time and material-solvent ratio were selected as influential factors， and the content of osthole was selected as response value. Box-Behnken design-response surface methodology was used to optimize the extraction technology of osthole in pine needles of C. deodara. Validation test was conducted. RESULTS： The optimal extraction technology was as follows as ethanol volume fraction of 88%， material-solvent ratio of 1 ∶ 20 (g/mL)， extracting for 2 times， lasting for 57 min each time. Under this technology， average content of osthole was 0.675 7 mg/g (RSD=1.78%， n=3)， and the relative error of which to predicted value 0.680 9 mg/g was 0.59%. CONCLUSIONS： The optimal extraction technology is simple and feasible，and it can be used for the extraction of osthole from the pine needles of C. deodara.

    KEYWORDS Pine needles of Cedrus deodara； Osthole； Extraction technology； Box-Behnken design； Response surface methodology

    雪松[Cedrus deodara (Roxb.) G.Don.]又名喜馬拉雅雪松、喜马拉雅杉、香柏，是松科(Pianaceae)雪松属(Cedrus Trew)植物，其针叶药用历史悠久，其中的主要化学成分为挥发油、黄酮类、苯丙素类、有机酸类、三萜类、甾体类、多糖及针叶胶类等，具有抗肿瘤、抗氧化、抗褐变、抗菌等药理活性[1-2]。本课题组前期对雪松松针进行了诸多研究，如采用高效液相色谱法/紫外-可见分光光度法测定雪松不同部位中4个黄酮类化合物、5种酚酸类成分以及原花青素的含量[3-5]；并且通过对雪松松针中丹皮酚、蛇床子素、和厚朴酚、厚朴酚4个有效成分的含量测定[6]，发现其中蛇床子素含量较高。

    蛇床子素又称甲氧基欧芹素，属于香豆素类化合物，具有较强的药理活性，对心脑血管系统、内分泌系统以及免疫系统等多种疾病均具有较为明显的药理作用[7]，是一个值得进一步研究和开发利用的活性成分。为了从雪松松针中提取纯化蛇床子素，本试验拟采用高效液相色谱法测定蛇床子素含量，在单因素考察的基础上，采用Box-Behnken设计-响应面法优选雪松松针中蛇床子素的提取工艺，为后续的研究提供试验参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    1100高效液相色谱仪，配置四元梯度泵、可变波长扫描紫外检测器、1100化学工作站和标准手动进样器(美国Agilent公司)；AE260万分之一分析天平(瑞士Mettler-Toledo公司)；HH-4电热恒温水浴锅 (北京科伟永兴仪器有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    雪松松针于2008年6月采自甘肃省兰州市，经甘肃省医学科学研究院何福江研究员、石长栓副研究员鉴定为松科雪松属植物雪松的针叶，将药材阴干并保存于阴凉库，待用；蛇床子素对照品(成都曼思特生物科技有限公司，批号：MUST-11123014，纯度：>98%，供含量测定用)；甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。, http://www.100md.com(范彬 李琳 石晓峰 沈薇 马趣环 刘东彦 王新娣)

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