干预治疗后第3、7天时，肉眼观察各组大鼠的创面愈合情况，包括创面色泽、渗出、组织水肿程度等情况。然后将带有网格的透明膜贴在大鼠创面处，采用扫描仪扫描并以Adobe Photoshop CS6 软件测算创面面积，计算创面愈合率[愈合率=(DFU造模时创面面积-干预治疗后第n天创面面积)/DFU造模时创面面积×100%]。同时，每组取5只大鼠，采集创缘组织，在4%多聚甲醛溶液中固定后，制作苏木精-伊红(HE)染色切片，然后在显微镜下观察创面组织中炎细胞、毛细血管和肉芽组织等情况。

    2.4 大鼠创面组织中β-catenin、GSK-3β、Rspo3的mRNA表达水平检测

    干预治疗后第3、7天时，每组取5只大鼠，采集创面边缘组织，迅速用生理盐水冲洗干净，滤纸吸干水分，放入无菌无酶的EP管中，置入冰盒并于-80 ℃条件下保存待测。采用RT-PCR法检测。首先按照试剂(盒)说明书步骤提取组织总RNA并反转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增(引物序列见表1)。扩增条件(反应体系为25 μL)：95 ℃预变性15 min；95 ℃变性 10 s，55 ℃退火 30 s，72 ℃延伸32 s，40个循环。PCR产物用1.0%琼脂糖凝胶进行电泳、染色、成像 ......