2.3 样品前处理

    精密量取200 μL大鼠全血样品，置于1.5 mL离心管中，加入内标溶液4 μL，旋涡混合30 s，然后加入0.1 mol/L的蛋白沉淀剂ZnSO4溶液400 μL，旋涡混合1 min后，再加入另一蛋白沉淀剂乙腈400 μL，旋涡混合1 min，静置10 min，然后以16 000 r/min离心10 min；将上层有机相转移至另一1.5 mL离心管中，加入1.5 mL乙酸乙酯，旋涡混合 1 min，静置10 min，再以16 000 r/min离心10 min；吸取上清液置于另一1.5 mL塑料离心管中，挥干；残渣用乙腈200 μL复溶，旋涡混合1 min，然后再以16 000 r/min离心10 min；取100 μL上清液加入进样瓶中，进样10 μL进行分析。

    2.4 检测条件

    2.4.1 色谱条件 色谱柱：Synergi Fusion-RP C18(50 mm×2 mm，4 ?m)；流动相：乙腈-0.02 mol/L乙酸铵 (95 ∶ 5，V/V)；流速：0.400 mL/min；进样体积：10 μL；分析时间：7 min。

    2.4.2 MS条件 离子源：电喷雾离子化源；气帘气压力：30.0 psi；碰撞气压力：高；喷雾电压：5 500 V；雾化温度：500 ℃；雾化气压力：50 psi；辅助气压力：50 psi；去簇电压：144.0 V；入口电势电压：10.0 V；碰撞池出口电势：10 V；定量分析离子反应：质荷比(m/z)821.5→768.4(他克莫司) ......