伊维菌素对人胃癌细胞BGC—823、MGC—803迁移和侵袭的影响及机制研究(3)
2.2.2 侵袭 将Transwell 小室置于24孔板内，每孔铺基质胶50 μL，再按“2.2.1”项下条件加入细胞和药液，每组设5个复孔，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h后，刮除上室中的基质胶和细胞，按“2.2.1”项下方法固定、染色，显微镜下摄片并计数结晶紫染色的细胞侵袭数。
2.3 Western blot法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、TGF-β1、TGF-βR、Smad2、Smad3蛋白的表达
选取处于对数生长期的BGC-823、MGC-803细胞，按1×105个/孔接种于6孔板，待细胞贴壁后分别给予伊维菌素5、10 ?mol/L(伊维菌素低、高浓度组)以及PBS(对照组)，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培養24 h后，提取总蛋白，BCA 蛋白定量试剂盒定量分析蛋白浓度，加入5×十二烷基硫酸钠(SDS)加样缓冲液混合 ......
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