2.6 心肌损伤指标和心功能指标的监测

    使用AU5400全自动生化分析仪采用比色法检测每个时间点的冠状静脉窦血清中肌钙蛋白T(cTnT)浓度，用于评价心肌损伤情况。通过犬左心室接能量转换器连接MD3000型生物信号系统予左室内压波形自动分析，测定每个时间点心脏左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)，用于监测心功能。

    2.7 心肌p-AMPK水平的检测

    取心尖部心肌组织，用10%甲醛固定，72 h内常规制作石蜡切片，石蜡切片4 ℃保存。常规脱蜡：60 ℃恒温箱烘烤20 min，放入二甲苯Ⅰ15 min，二甲苯Ⅱ15 min。常规梯度乙醇水化，抗原6 min×2次修复，6%血清封闭60 min；滴加一抗(1 ∶ 100)50 ?L，4 ℃下保存18 h；滴加二抗50 ?L，37 ℃保存1 h；加入二氨基联苯胺(DAB，1 ∶ 100)显色，光镜下观察细胞核及胞浆为黄色、黄褐色为阳性显色，在显微镜下控制染色时间和程度；水洗，苏木精染色，再水洗，脱水，透明，封固 ......