造模1 h后，各组另取4只大鼠麻醉，取胃组织沿胃大弯剪开，生理盐水洗净，滤纸吸干，每组称取胃组织300 mg，用眼科剪于冰浴上剪碎，加入8倍量的RIPA裂解液，裂解30 min，收集于1.5 mL的离心管中，4 ℃条件下，12 000 r/min离心(离心半径为7 cm)10 min，收集上清液，即得总蛋白提取液。采用二喹啉甲酸(BCA)法对总蛋白提取液进行蛋白浓度测定，经蛋白上样缓冲液稀释后，100 ℃沸水变性，备用。每组取蛋白样品20 μg进行聚丙烯酰氨凝胶电泳，电泳结束后转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上，以5%脱脂奶粉置于摇床上封闭1 h，加入相应一抗[p-NF-κB p65(1 ∶ 1 000)、NF-κB p65(1 ∶ 1 000)、p-IκBα(1 ∶ 1 000)、IκBα(1 ∶ 1 000)、β-actin(1 ∶ 5 000)]，4 ℃孵育过夜，次日用TBST洗膜3次，每次5 min；加入二抗[HRP-IgG(1 ∶ 5 000)]，室温孵育1 h，然后TBST洗膜3次，每次5 min，然后进行显影处理 ......