取液氮罐中肾组织解冻，按下列步骤提取总RNA：肾组织(20～30 mg)加 Trizol试剂冰浴匀浆，加氯仿震荡，2～4 ℃低温静置，并在低温下12 000 r/min离心15 min。取上层无色水相，加入-20 ℃預冷的异丙醇0.5 mL混匀，静置30 min，在低温下12 000 r/min离心10 min。取附壁沉淀加75%乙醇冲洗溶解，溶解液7 500 r/min离心5 min，低温静置后除残留液，加DEPC处理水溶解，得总RNA溶液。取总RNA溶液5 ?L加溴酚蓝1 ?L混匀，90 V条件下以0.1%琼脂糖凝胶电泳15 min，核酸染料显色，采用凝胶成像分析系统分析结果。

    2.4.2 RT-PCR检测 PCR反应体系：cDNA模板，2 μL，10 μmol/L上、下游引物各1 μL，2×PCR Taq Mix 12.5 μL，以水补充至终体积25 μL。反应条件：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性50 s，56 ℃退火50 s ......