2.7 瘤體组织中Bcl-2、Bax蛋白表达

    采用Western blot法。将瘤体组织剪碎，PBS洗涤2次，4 500 r/min离心5 min，弃洗涤液，取出样本置于匀浆器内，按组织-蛋白裂解液(1 g ∶ 1 L)进行匀浆后，振荡10 min，随后进行95 ℃金属浴灭活。然后以5 000 r/min离心10 min，取上清，BCA法进行蛋白定量，琼脂糖凝胶电泳并转移至聚偏二氟乙烯膜，5%脱脂奶粉封闭2 h，选用Bcl-2、Bax(1 ∶ 50)和β-actin(1 ∶ 500)一抗，-4 ℃冷藏过夜；TBST缓冲液溶液洗膜2次，每次3 min；加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG二抗(1 ∶ 1 000)，常温下孵化3 h，TBST洗膜2次，每次3 min，发光后选用凝胶成像系统，以目的蛋白条带灰度值与内参(β-actin)条带灰度值的比值表示目的蛋白的相对表达量。

    2.8 统计学方法

    采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计量资料以x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析 ......