博落回提取物中血根碱的离子交换树脂分离纯化工艺研究(4)
2.3.6 博落回精提物溶液的精制纯化 为除去精提物溶液中的醋酸铵、氯化钠等无机盐,将“2.3.4”项下得到的精提物溶液直接上样至反相C18制备级色谱柱中,用2 BV的20%甲醇溶液以15 mL/min流速进行脱盐;然后以2 BV的甲醇同流速洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得到橙红色精制纯化干燥粉末,纯化收率为71%。经HPLC法检测,该精制纯化物的纯度为97%,并通过与血根碱对照品溶液的保留时间比对可初步判断为血根碱。所得精制纯化物的HPLC检测结果见图4。2.4 博落回提取物精制纯化物的结构确证
取“2.3”项下制备的博落回精制纯化物,经HPLC法、紫外分光光度法、质谱法(MS)和核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)分别检测。结果,该化合物与血根碱对照品保留时间一致,紫外特征吸收波长分别为270、328、335(肩峰)、400、475 nm;电喷雾(ESI)-MS谱显示,质荷比(m/z)为332.5,与血根碱分子[C20H14NO4]+一致;1H-NMR谱(600 MHz,CD3OD)显示,δ为9.90(1H ......
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