地龙药材的质量标准提升研究(4)
3.2 供试品溶液制备方法的考察
在前期研究中，笔者分别对供试品溶液制备过程中的提取溶剂、提取方法以及溶剂用量等进行了考察。(1)提取溶剂的考察：根据文献报道，不同溶剂用于核苷类成分提取效果依次为甲醇<80%甲醇<40%甲醇<30%甲醇<20%甲醇<10%甲醇<纯水，以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂时的色谱峰比以95%、75%、50%及25%甲醇为提取溶剂时更多[16-17]。在此研究背景下，本研究在供试品溶液制备中分别考察了以0.9%氯化钠注射液和水为溶剂的提取效果。结果显示，与以水为提取溶剂时比较，以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂时测得的地龙药材中次黄嘌呤和肌苷含量均更高，故最终以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂进行供试品溶液的制备。(2)提取方法的考察：笔者考察了超声提取法和加热回流提取法[18]的提取效果。结果，与超声提取法相比，加热回流提取法提取得到的次黄嘌呤和肌苷含量相对较高;改变回流提取时间(30、60、90、120 min)，发现在提取90 min时待测物提取含量达到最高，故最终选择采用加热回流提取90 min。(3)溶剂用量的考察：笔者还考察了不同溶剂用量(25、50、100 mL)的提取效果。结果，当溶剂用量为50、100 mL时，待测物提取含量无明显差异，从经济角度出发，选择溶剂用量为50 mL。故最终采用0.9%氯化钠注射液50 mL加热回流提取90 min的方法作为供试品溶液的制备方法。
, 百拇医药
本研究结果显示，15批地龙药材中肌苷的含量均高于次黄嘌呤，各地、各批次地龙药材中次黄嘌呤和肌苷的含量差异较大，且未见明显规律，这可能与其生存环境、产地、采收时间有关，具体原因有待后期采集更多产地、批次样品设计相关试验进一步研究。本研究基于2015年版《中国药典》(一部)现有的地龙药材质量标准，增加了对地龙中次黄嘌呤、肌苷含量测定和HPLC指纹图谱鉴别方法，且建立的方法操作简便、重复性好，提升了地龙药材质量标准，对提高地龙药材的质量具有重要的意义。
参考文献
[ 1 ] 国家药典委员會.中华人民共和国药典：一部[S]. 2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：122-123.
[ 2 ] 吴普.神功本草经：第三卷[M].北京：人民卫生出版社，1963：123.
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, 百拇医药
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, http://www.100md.com
[13] 张彬，李倩，党爱华. HPLC法同时测定赤子爱胜蚓药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、腺苷的含量[J].中国药房，2016，27(12)：1692-1694.
[14] 姜文红，张清波.地龙HPLC指纹图谱分析方法的研究[J].中医药学报，2006，34(6)：13-14.
[15] 吴文如，李薇，赖小平. HPLC法测定不同产地地龙中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷的含量[J].中国药师，2011，14(7)：914-917.
[16] 明凯利，向阳，杨艳霞，等.小金胶囊的HPLC指纹图谱建立及主成分分析[J].中国药房，2019，30(2)：188-192.
[17] 曹文杰. HPLC法测定复方地龙胶囊中尿嘧啶、次黄嘌呤和肌苷的含量[J].北方药学，2015，12(9)：5-6.
[18] 黄帅，徐风，杨平，等.地龙的HPLC特征图谱研究[J].中国药房，2015，26(21)：2971-2974.
(收稿日期：2019-03-19 修回日期：2019-07-24)
(编辑：林 静), 百拇医药(王莎莎 曲悦 薛大权 李兰清 向阳 张宝徽)
在前期研究中，笔者分别对供试品溶液制备过程中的提取溶剂、提取方法以及溶剂用量等进行了考察。(1)提取溶剂的考察：根据文献报道，不同溶剂用于核苷类成分提取效果依次为甲醇<80%甲醇<40%甲醇<30%甲醇<20%甲醇<10%甲醇<纯水，以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂时的色谱峰比以95%、75%、50%及25%甲醇为提取溶剂时更多[16-17]。在此研究背景下，本研究在供试品溶液制备中分别考察了以0.9%氯化钠注射液和水为溶剂的提取效果。结果显示，与以水为提取溶剂时比较，以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂时测得的地龙药材中次黄嘌呤和肌苷含量均更高，故最终以0.9%氯化钠注射液为提取溶剂进行供试品溶液的制备。(2)提取方法的考察：笔者考察了超声提取法和加热回流提取法[18]的提取效果。结果，与超声提取法相比，加热回流提取法提取得到的次黄嘌呤和肌苷含量相对较高;改变回流提取时间(30、60、90、120 min)，发现在提取90 min时待测物提取含量达到最高，故最终选择采用加热回流提取90 min。(3)溶剂用量的考察：笔者还考察了不同溶剂用量(25、50、100 mL)的提取效果。结果，当溶剂用量为50、100 mL时，待测物提取含量无明显差异，从经济角度出发，选择溶剂用量为50 mL。故最终采用0.9%氯化钠注射液50 mL加热回流提取90 min的方法作为供试品溶液的制备方法。
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本研究结果显示，15批地龙药材中肌苷的含量均高于次黄嘌呤，各地、各批次地龙药材中次黄嘌呤和肌苷的含量差异较大，且未见明显规律，这可能与其生存环境、产地、采收时间有关，具体原因有待后期采集更多产地、批次样品设计相关试验进一步研究。本研究基于2015年版《中国药典》(一部)现有的地龙药材质量标准，增加了对地龙中次黄嘌呤、肌苷含量测定和HPLC指纹图谱鉴别方法，且建立的方法操作简便、重复性好，提升了地龙药材质量标准，对提高地龙药材的质量具有重要的意义。
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[18] 黄帅，徐风，杨平，等.地龙的HPLC特征图谱研究[J].中国药房，2015，26(21)：2971-2974.
(收稿日期：2019-03-19 修回日期：2019-07-24)
(编辑：林 静), 百拇医药(王莎莎 曲悦 薛大权 李兰清 向阳 张宝徽)