二苯乙烯苷对冈田酸致NG108-15细胞Tau蛋白磷酸化的影响(3)
2.3 细胞增殖情况检测采用MTT法检测。取对数生长期的NG108-15细胞适量,以6×104个/孔接种于96孔板中,培养24 h。将细胞随机分为正常对照组、模型组和TSG低、中、高剂量组(50、100、200 μmol/L,剂量设置参考本课题组前期预试验结果),每组设5个复孔。吸弃各孔上清液,正常对照组加入完全培养基1 mL,各给药组加入含相应药物的完全培养基1 mL,继续培养24 h。除正常对照组外,其余各组均按“2.2”项下方法复制AD细胞模型。随后每孔加入5 mg/L的MTT溶液10 μL,避光孵育4 h,弃去上清液,每孔加入二甲基亚砜100 μL,室温振荡10 min,使用连续光谱扫描式酶标仪于490 nm波长处检测各孔的光密度(OD)值,并计算细胞生存率,生存率(%)=(试验组细胞平均OD值/正常对照组细胞平均OD值)×100%。上述试验重复3次。
2.4 细胞凋亡情况检测
采用AO/EB双染色法检测。取对数生长期的NG108-15细胞适量,以4×105个/孔接种于6孔板中 ......
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