采用UPLC-MS/MS法研究树豆酮酸A在不同种属肝微粒体中的代谢差异(4)
在色谱流动相的筛选过程中,本研究比较了乙腈和甲醇的分离效果。结果显示,与甲醇相比,乙腈可使待测物具有更高的质谱响应和更低的背景噪声,色谱峰峰形更佳,故选择乙腈作为流动相的有机相。此外笔者还发现,在流动相中添加适量甲酸可提高待测物的电离强度,并可缩短CAA的保留时间,故在两相比例优化的基础上,最终将流动相确定为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)(45 ∶ 55,V/V)。在质谱扫描模式的考察中,本研究比较了正、负离子模式下待测物的质谱响应情况。结果发现,在正离子模式下,CAA基本无响应;而在负离子模式下,CAA和内标的响应均较强。因此,本研究选择了负离子模式。
本课题组前期对槲皮素、儿茶酚、儿茶素、染料木素、葛根素、杨梅素等内标物质进行了筛选。结果发现,以染料木素为内标时,该化合物与CAA可基线分离,且两者回收率均较高,故以染料木素作为CAA定量分析的内标。
3.2 底物濃度的选择
在体外代谢研究中 ......
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