2.4 BAC对A549细胞凋亡的影响考察

    采用流式細胞术检测细胞凋亡率。取对数生长期细胞，胰酶消化，以800 r/min离心5 min后，用完全培养基调整细胞密度至1×105个/mL，接种2 mL于6孔板，于37 ℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养，待细胞融合率约为60%时弃去原培养液。将细胞分为对照组(不含BAC)和BAC低、高剂量组(200、400 μmol/L;剂量根据“2.3”项下考察结果制定，下同)，加入含相应浓度BAC的无血清基础培养基2 mL，继续分别培养24、48 h后，加入0.25%不含EDTA的胰酶消化。收集各组细胞，4 ℃下以800 r/min离心5 min;弃去上清，以PBS漂洗2次后，再以PBS 500 μL重悬细胞并计数。每组取1×106个细胞，先后加入AnnexinV-FITC、PI染色试剂各5 μL，混匀，在冰上避光孵育15 min后，在1 h内采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。采用FlowJo V10软件进行数据采集及处理。每组设置3个复孔 ......