2.4 Western blot检测c-myc蛋白表达

    参考文献[11]方法，采用Western blot法检测细胞中c-myc蛋白表达水平。试验分组与给药情况同“2.2”项下方法操作，作用48 h后，收集细胞，细胞中加入100 μL裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂苯***** )进行细胞裂解，提取蛋白并测定总蛋白浓度。以10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，转PVDF膜，封闭后，加入兔抗人c-myc单克隆抗体(稀释比例：1 ∶ 10 000)，4 ℃下放置过夜。洗膜后，将膜与HRP标记的山羊抗兔IgG二抗(经小鼠、人免疫球蛋白吸附)(稀释比例：1 ∶ 10 000)共同孵育1 h后，将化学荧光发光底物均匀地加到膜的表面，并使反应持续5 min，暗盒显影。通过Image J软件分析目标条带灰度，以GAPDH为内参，计算c-myc蛋白相对表达量。

    2.5 统计学方法

    所有数据以x±s表示，应用SPSS 17.0统计软件进行分析，多组比较采用ANOVA方差分析，方差齐时采用LSD检验进行两兩样本之间的多重比较，方差不齐时采用Dunnett’s T3检验进行多重比较。P<0.05表示差异具有统计学意义。

    3 结果

    3.1 细胞存活率

    12.5、25、50、100、200 ?mol/L的苯扎贝特作用下PC-9细胞存活率分别为(80.76±3.2)%、(74.35±5.06)%、(62.8±1.23)%、(59.03±1.55)%、(39.8±1.01)%;而非诺贝特作用下PC-9细胞存活率分别为(74.46±1.30)%、(61.91±4.77)%、(48.95±2.8)%、(37.05±1.55)%、(32.49±1.36)% ......