2.5 酶联免疫吸附法检测皮肤组织中DLL3含量

    取各组15只处死小鼠背部皮肤，加入生理盐水，组织匀浆机研磨成组织匀浆，浓度为10%，4 000 r/min(离心半径8.3 cm)离心10 min后提取上清液。按小鼠DLL3酶联免疫试剂盒相关操作测定上清液中DLL3含量，并以每1 mL上清液中总蛋白含量(BCA法蛋白定量试剂盒测定)校正结果。

    2.6 免疫组化法检测皮肤组织中Jagged1蛋白表达

    各组取5只处死小鼠的背部注射区皮肤，4%多聚甲醛中固定、脱水、包埋、切片，脱蜡，放入柠檬酸钠液中，微波修复5 min，用3% H2O2封闭20 min，磷酸盐缓冲液冲洗，加入兔抗小鼠Jagged1抗体(1 ∶ 100稀释)，4 ℃孵育过夜，加入辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG二抗 (1 ∶ 100稀释)，室温孵育1 h，二氨基联苯胺法(DAB)染色，苏木精复染。用显微镜摄片后输入计算机，Image Pro Plus 6.0专业图像分析软件对图片进行分析，调整图像分析软件在相同条件下计算积分光密度(IOD)和组织面积(area) ......