蒲桃不同药用部位乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制作用研究(4)
在确定其为可逆抑制类型的情况下,固定α-葡萄糖苷酶浓度为0.1 U/mL,在不添加(0 μg/mL)和添加蒲桃种子醇提物(质量浓度为3.0、6.0 μg/mL)的条件下,测定其在不同pNPG浓度(1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mmol/L)反应体系下的反应初速率,以底物浓度的倒数(1/S)为横坐标和反应初速率的倒数(1/V)为纵坐标绘制Lineweaver-Burk曲线,以判断其属于竞争性抑制类型还是非竞争性抑制类型,结果详见图2。由图2可知,3组直线均交于纵轴,即反应速率Vmax不变,为0.016 15 (L·min)/mmoL;斜率(米氏常数Km)随蒲桃种子醇提物质量浓度的增大而增大,为典型的竞争性抑制类型。结果提示,蒲桃种子乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用为可逆竞争性抑制。
2.6 对α-淀粉酶抑制作用的动力学试验
由于蒲桃种子对α-淀粉酶抑制作用顯著强于其他药用部位,因此本研究选用蒲桃种子进行α-淀粉酶抑制作用的动力学试验。参考文献方法[13]并作适当调整,具体如下:固定淀粉酶浓度为1.0% ......
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