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编号:13524341
血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响(3)
http://www.100md.com 2019年12月1日 《中国药房》 201923
     2.1.3 穿支皮瓣病理学检查和微血管密度检测 敷药7 d后,各组大鼠腹腔注射过量戊巴比妥钠处死。取各组大鼠腹部穿支皮瓣组织于4%多聚甲醛中固定24 h后,常规石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色,然后于光学显微镜下(×200)分别观察各组大鼠穿支皮瓣的成纤维细胞增生、中性粒细胞浸润、肉芽组织生长的情况;每张切片随机选取3个不同视野进行微血管断面计数,以微血管断面平均数作为微血管密度。

    2.2 细胞试验

    2.2.1 HUVEC细胞缺氧缺糖/复氧复糖模型的建立及分组 当HUVEC细胞生长密度达80%~85%时,更换成DMEM无糖培养基,放入厌氧盒内进行缺氧培养16 h后,加入正常细胞培养液,放入37℃ 5%CO2培养箱中培养24 h后,即建立HUVEC细胞缺氧缺糖/复氧复糖模型[12]。本研究将细胞分为正常组、模型组和血竭素高、中、低浓度组(2.5、1.0、0.5 μg/mL);正常组不加药正常培养,模型组缺糖缺氧培养16 h后,复糖复氧培养24 h,血竭素高、中、低浓度组细胞缺糖缺氧培养16 h后,按上述剂量给药 ......
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