2.7 方法学验证

    2.7.1 特异性试验 在所有鞭类样品中，每批次随机抽取一份DNA稀释液为模板，以无菌双蒸水作为阴性对照，按“2.5”项下方法进行PCR扩增及1.5%琼脂糖凝胶电泳分析。

    2.7.2 重复性试验 在同一实验室内，由同一实验人员在相同条件下按“2.7.1”项下方法重复进行2次试验。

    3 结果

    3.1 样品基因组DNA提取片段完整性

    0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示，所提取的牛鞭及其伪品样品基因组DNA均在相应泳道内出现明显条带，表明已成功提取样品基因组DNA，詳见图1。

    3.2 样品DNA的纯度和浓度

    结果显示，每批次牛鞭及其伪品提取所得DNA的OD260/280均在1.8～2.0范围内，表明均未被蛋白或RNA污染。其纯度和浓度检测结果详见表1。

    3.3 样品DNA的PCR产物电泳结果

    1.5%琼脂糖凝胶电泳结果显示，牛鞭样本在200～300 bp之间均出现明显条带，几种伪品未见条带，表明该方法能够将牛鞭样本及其伪品进行区分。PCR产物电泳图详见图2。

    3.4 牛鞭样本DNA测序结果

    测序结果经NCBI Nucleotide-BLAST软件比对后显示，牛鞭样品所得目的片段的核苷酸序列与GeneBank中已登记的牛鞭物种相似性均为100%，证明克隆所得DNA片段即为牛鞭目的基因片段。以延边黄牛鞭为例 ......