复方人参免疫增强方配比优选及其对小鼠的免疫活性和急性毒性研究(2)
1.5 动物SPF级昆明种小鼠260只,雌雄各半,体质量18~22 g,购自辽宁长生生物技术股份有限公司,动物生产许可证号:SCXK(辽)2015-0001。
2 方法
2.1 药材提取物制备
复方人参免疫增强方的4味组方药材的单味提取物由长春中医药大学中药保健食品科技创新中心制备:取人参饮片50 g,水煎3次,每次1h,合并3次水煎提取液,浓缩,减压干燥,粉碎,即得人参提取物粉末;同法制备黄芪、黄精、枸杞饮片提取物粉末。人参、黄芪、黄精、枸杞4味饮片提取物得率分别为12%、14%、15%、20%。
2.2 组方药材生药量浓度范围筛选
2.2.1 细胞培养取RAW264.7细胞,以含100 U/mL青霉素一链霉素双抗、10%胎牛血清的DMEM高糖培养基(以下简称“完全培养基”)在37℃、5% C02的培养箱中培养,隔日传代。
2.2.2 提取物药液配制取“2.1”项下各味药材提取物粉末适量,以DMEM高糖培养基为溶剂配制人参提取物质量浓度分别为0.12、0.18、0.36、0.54、0.72、0.90、1.08、1.44、1.80、2.40 mg/mL ......
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