基于斑马鱼模型的西洋参提取物心脏保护作用研究(2)
由图1可知,当西洋参提取物质量浓度≤50μg/mL时,斑马鱼幼鱼死亡率均为O;当西洋参提取物质量浓度≥100μg/mL时,斑马鱼幼鱼死亡率随着西洋参提取物质量浓度的增加而升高。回归分析结果显示,西洋参提取物的最低致死质量浓度为44.18μg/mL。为了保证实验过程中斑马鱼的正常存量,故将西洋参提取物的给药质量浓度设为5、10、25μg/mL(以生药量计)进行后续心脏保护作用研究。2.4 特非那定对斑马鱼心脏形态的影响考察
将发育至24hpf的斑马鱼受精卵用1mg/mL链酶蛋门酶E脱膜后,体式显微镜下筛选发育正常的幼鱼,然后随机置于24孔板中,每孔10条。将实验分为不同质量浓度特非那定组(2、2.5、3、4μg/mL)和空门对照组(0.5% DMSO),每组平行2孔(即每组20条斑马鱼样本)。加盖后将斑马鱼置于28℃恒温光照培养箱中孵育48 h后,采用体式显微镜观察斑马鱼心脏部位的形态变化。采用Image Pro-plus 5.O软件测量斑马鱼心脏SV-BA间距,录像20s观察其心脏律动及血流情况,以此来筛选特非那定最优心脏损伤造模剂量。在每组20条斑马鱼样本中剔除死亡、畸形以及数据异常的斑马鱼样本 ......
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