瓜蒂水提物和醇提物对食管癌TE-1、EC-1细胞的增殖、迁移、克隆形成的影响及机制研究(2)
1.3 细胞人食管癌细胞株TE-1、EC-1为河南中医药大学中医方证信号传导重点实验室保存。
2 方法与结果
2.1 瓜蒂提取物的制备
2.1.1 瓜蒂水提物称取瓜蒂药材20g，加入350mL水浸泡1h，武火煮沸，文火煎煮约1h，放至室温后过滤，55℃旋蒸至药液浓稠，50℃真空干燥48h后刮取药物粉末、称质量，得率为141.2mg/g;取适量瓜蒂水提物粉末用DMSO适量溶解，加水制成质量浓度为300mg/mL的瓜蒂水提物母液(以提取物粉末计，下同)，再用培养基稀释成4mg/mL药液，0.22μm滤头过滤除菌，-20℃冰箱保存，备用。
2.1.2 瓜蒂醇提物取瓜蒂药材100g于粉碎机中粉碎，按照1：7(m/V)加入95%乙醇700mL，混匀，避光浸泡7d，每日振荡2次，5min/次;7d后过滤，55℃旋蒸至药液浓稠，50℃真空干燥48h后刮取药物粉末、称质量，得率为52.4mg/g;取适量瓜蒂醇提物粉末按“2.1.1”项下“DMSO溶解……备用”处理，即得。
2.2 细胞培养
将细胞置于37℃、5% CO2培养箱中，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液进行培养 ......
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