2.5 细胞周期检测

    采用流式细胞术检测。取经胰蛋白酶消化的A549细胞，以1×106个/孔细胞接种于6孔板中，培养24 h后，按“2.4”项下方法分组、给药，每组设3个复孔。分别于培养的24、48、72 h时，收集细胞，按PI染色法细胞周期检测试剂盒进行染色，采用流式细胞仪检测各组细胞周期，记录各周期细胞比例。

    2.6 细胞线粒体膜电位变化情况检测

    采用流式细胞术检测。取经胰蛋白酶消化的A549细胞，以1×106个/孔细胞接种于6孔板中，培养24 h后，按“2.4”项下方法分组、给药，每组设3个复孔。于培养48 h(培养时间根据前期研究确定，此时细胞密度最佳且形态较为一致)时，收集细胞，按JC-1染色法细胞线粒体膜电位检测试剂盒说明书进行操作，使用流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位的变化情况，并计算线粒体膜电位降低的细胞占细胞总数的百分比(即降低率)。

    2.7 统计学方法

    采用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析，采用Graphpad Prism 5.0软件作图。计量资料均以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。

    3 结果

    3.1 美洲大蠊提取物YS-A～H对A549细胞增殖的影响及活性部位的筛选结果

    美洲大蠊提取物YS-A～H的IC50值分别为(95.25±8.42)、(129.93±7.24)、(221.28±12.68)、(275.39±14.87)、(276.76±16.32)、(31.90±5.34)、(163.15±6.97)、(122.81±8.36)μg/mL ......