2.2 药敏试验

    供试菌株经革兰氏染色初步分类后，采用全自动微生物鉴定及药敏系统鉴定菌种，以纸片扩散法、琼脂倍比稀释法等进行药敏试验，严格按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)2017年标准[7]操作并判定结果。

    2.2.1 抑菌圈测定 采用纸片扩散法[7]。将含有不同溶剂萃取物供试溶液(250 mg/mL，剂量参考本课题组前期预试验结果设定)20 μL的无菌药敏纸片置于含标准量病原菌接种物(1.5×108 CFU/mL)的MH琼脂培养基中，并以DMSO为阴性对照，于37 ℃、5%CO2条件下培养18 h，使用游标卡尺测量药敏纸片周围的抑菌圈直径，以筛选具有抗菌活性的萃取部位。判定标准——抑菌圈直径<10 mm，无抑菌作用;10 mm，轻度敏感;11～15 mm，中度敏感;≥16 mm，高度敏感[7]。

    2.2.2 最小抑菌浓度(MIC)测定 采用琼脂倍比稀释法[7]。精密称取“2.2.1”项下具有抗菌活性的萃取部位适量，用MH琼脂培养基稀释，制成质量浓度分别为12.5、6.25、3.125、1.562 5、0.781 3、0.39、0.195、0.097 6 mg/mL的含药平皿 ......