芹菜素影响非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的RAD51基因调控机制研究(3)
2.3 芹菜素对A549/DDP细胞凋亡的影响考察采用Annexin Ⅴ/PI双染色法结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。取对数生长期A549/DDP细胞,按“2.2”项下方法按每孔1×106个加至96孔板中,随机分为对照组、顺铂组和芹菜素低、高剂量组,并同法给药。各组细胞在37 ℃、5%CO2条件下培养48 h后,以RPMI 1640培养基制成1×106个/mL的单细胞悬液,以800 r/min离心5 min,PBS洗涤,加入Annexin Ⅴ-FITC试液5 μL、PI试液10 μL混匀后染色30 min。采用流式细胞仪检测细胞凋亡数并计算凋亡率:细胞凋亡率=凋亡细胞数/(凋亡细胞数+正常细胞数)×100%。试验均重复3次。
2.4 芹菜素联用对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响考察
依据“2.2”项下芹菜素对A549/DDP细胞增殖的影响考察结果,采用MTT法考察芹菜素联用对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响。取对数生长期A549/DDP细胞,按“2.2”项下方法接种至96孔板中 ......
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