钩吻总碱抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用研究(3)
2.8 HUVEC管腔形成情况检测采用管腔形成试验检测。用4 ℃预冷的移液枪吸取Matrigel基质胶置于24孔板中,平铺,于37 ℃平衡40 min。取对数生长期的HUVEC适量,经含EDTA的胰蛋白酶消化、计数后,以1×105个/mL按2 mL/孔接种至6孔板中,将细胞随机分为空白组和TAG低、中、高剂量组(40、80、120 μg/mL),空白组加入RPMI 1640完全培养基2 mL,各给药组加入含相应药物的RMPI 1640完全培养基2 mL,培养24 h后,以含EDTA化的胰蛋白酶消、计数,用RMPI 1640完全培养基调整各组细胞浓度至5.0×105个/mL。吸取上述单细胞悬液以1.0×105个/孔接种至铺好基质胶的24孔板中,每组设3个复孔,分别于培养的4、12、24 h时使用倒置荧光显微镜观察管腔形成的情况,随机选择5个视野,使用Image Pro-Plus 6.0分析,取平均值作为检测结果。上述试验重复3次。
2.9 统计学方法
使用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。计量资料以x±s表示 ......
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